ინფექციური მსხვილფეხა რქოსანი რინოტრაქეიტის ვირუსის ანტისხეულების ELISA გამოვლენის ნაკრები

მოდელის ნომერი: VD105E
აბრ.:IBRV Ab Elisa
ნიმუში: შრატი

აღწერა

სპეციფიკაცია

BVDV აბ ელისა

განკუთვნილი გამოყენება: ინფექციურიმსხვილფეხა რქოსანი რინოტრაქეიტის ვირუსიანტისხეულების ELISA გამოვლენის ნაკრები გამოიყენებაინფექციური რინოტრაქეიტის დადგენავირუსის ანტისხეულები მსხვილფეხა რქოსანი შრატში in vitro.

ნიმუში: შრატი

მოწოდებული მასალები:

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

ტესტის პროცედურები და ინტერპრეტაცია

ნაბიჯი 1 ტესტის პროცედურა

1.1 სარეცხი ხსნარის მომზადება

Wორნგული კონცენტრაცია wფერფლის სითხე:გამოყენებამდე სარეცხი ხსნარი უნდა აღდგეს ოთახის ტემპერატურამდე (20-25 გრადუსი) და თანაბრად შეანჯღრიოთ, რათა ის ერთგვაროვანი გახდეს. შემდეგ კონცენტრირებული სარეცხი ხსნარი განზავდეს 20-ჯერ გაწმენდილი წყლით (მაგალითად, 5 მლ კონცენტრირებული სარეცხი ხსნარი ემატება 95 მლ გაწმენდილ წყალს), კარგად აურიეთ და განზავებული სარეცხი სითხე შეიძლება შეინახოთ 2-8 გრადუსზე 7 დღის განმავლობაში.

1.2 ნიმუშის მომზადება

① აღებული იქნა ცხოველის მთელი სისხლი, ცენტრიფუგირებულ იქნა 4000 rpm-ზე 10 წუთის განმავლობაში და შეგროვდა სუპერნატანტი. შრატი ასევე შეიძლება ბუნებრივად შედედდეს ჰემოლიზის გარეშე.

② განზავდეს შესამოწმებელი შრატი 50-ჯერ შრატის განზავების ფირფიტაში (მაგალითად: დაამატეთ 3 ულტრა შესამოწმებელი შრატი 147 მლ სინჯის გამხსნელს).

შენიშვნა: უარყოფითი და დადებითი კონტროლი არ უნდა განზავდეს

1.3 ტესტირების პროცედურა

① აიღეთ ფერმენტის ეტიკეტი Microplate (ნიმუშების რაოდენობის მიხედვით, შეიძლება დაიშალა და გამოიყენოთ რამდენჯერმე), დაამატეთ 100 მლ განზავებული შრატი ფერმენტის ეტიკეტზე Microplate, დააყენეთ ორი ჭაბურღილი უარყოფითი კონტროლისთვის და დადებითი კონტროლისთვის და დაამატეთ 100 მლ რეაქციის ჭაბურღილს შესაბამისად. ნაზად შეანჯღრიეთ ნიმუში ჭაში, დალუქული ფირფიტის გამოყენებით ფირფიტის დასაფარავად და ინკუბაცია 37 გრადუსზე 30 წუთის განმავლობაში.

②გახსენით დალუქვის ფირფიტა, კარგად შეანჯღრიეთ ხსნარი ფირფიტაში, დაამატეთ 300µl სამუშაო კონცენტრაციის სარეცხი სითხე თითოეულ ჭაბურღილში და შემდეგ გადაყარეთ სითხე ჭაში. გაიმეორეთ ზემოაღნიშნული ნაბიჯები 5-ჯერ და ბოლოს გააშრეთ სუფთა შთამნთქმელ ქაღალდზე.

③განზავებული ფერმენტის კონიუგატი: განზავდეს ფერმენტის კონიუგატი (80×) 80-ჯერ (მაგალითად: 10 მლ ფერმენტის კონიუგატის კონიუგატი + 790 ul ნიმუშის გამხსნელი, საჭირო სპეციფიკური რაოდენობა გამოითვლება ტესტის ნიმუშების რაოდენობის მიხედვით), კარგად აურიეთ და გააჩერეთ.

④ თითოეულ ჭაბურღილს დაამატეთ 100µl ფერმენტის კონიუგატი, დააფარეთ თეფშს და გააჩერეთ 37 გრადუსზე 30 წუთის განმავლობაში.

⑤ სარეცხი ფერმენტის ფირფიტა, სპეციფიური ოპერაცია იგივეა, რაც ზემოთ ②.

⑥ თითოეულ ჭაბურღილს დაუმატეთ 100µl სუბსტრატის ხსნარი, დააფარეთ ფირფიტა და გააჩერეთ 10 წუთის განმავლობაში სინათლისგან 37 გრადუსზე დაშორებით.

ნაბიჯი 2 შედეგის ინტერპრეტაცია

თითოეული ჭაბურღილის OD450 მნიშვნელობა წაკითხული იყო 96 ჭაბურღილიანი მიკროფირფიტის მკითხველზე.

2.1 ვალიდაცია უარყოფითი კონტროლის საშუალო OD450nm მნიშვნელობა იყო <0.25 და დადებითი კონტროლის საშუალო OD450nm მნიშვნელობა იყო 0.6-ზე მეტი ან ტოლი, ექსპერიმენტული შედეგები ვალიდური იყო. წინააღმდეგ შემთხვევაში, ტესტი უნდა განმეორდეს.

2.2 გაანგარიშების მეთოდი

თითოეული ნიმუშისთვის გამოთვალეთ S/P შემდეგნაირად შესწორებული ნიმუშისა და საკონტროლო მნიშვნელობების გამოყენებით:

product-554-49

2.3 შედეგის ინტერპრეტაცია

როდესაც S/P < 0.2, ის ფასდება როგორც უარყოფითად.

როდესაც S/P > 0.3, იგი შეფასებულია როგორც დადებითი.

როდესაც 0.2-ზე ნაკლები ან ტოლია S/P-ზე ნაკლები ან ტოლია 0.3-ზე, იგი შეფასებულია, როგორც საეჭვო და ვარაუდობენ, რომ განმეორდეს ნიმუშის აღება და ტესტირება ერთი კვირის შემდეგ.

ცხელი ტეგები: ინფექციური მსხვილფეხა რქოსანი რინოტრაქეიტის ვირუსის ანტისხეულების ელიზას გამოვლენის ნაკრები, ჩინეთი მსხვილფეხა რქოსანი ინფექციური რინოტრაქეიტის ვირუსის ანტისხეულების ელიზას გამოვლენის ნაკრების მომწოდებლები, მწარმოებლები, ქარხანა

წინა: მსხვილფეხა

შემდეგი 2: ფეხისა და პირის ღრუს დაავადება ვირუსი-ო ანტისხეულების ელიზა ნაკრები